如何正确使用超滤离心管？注意事项和常见问题解答

超滤离心管（Ultrafiltration Centrifugal Filter）是一种用于蛋白浓缩、缓冲液更换、核酸纯化、小分子去除的高效实验工具。正确操作不仅能提高样品回收率，也能确保过滤效率与实验重复性。

一、使用前准备

✔ 1. 选择合适的 MWCO

根据实验所需截留的目标分子量选择对应的 MWCO（如 10 kDa、30 kDa、50 kDa 等）。

✔ 2. 预润湿过滤膜

部分膜材质需要预润湿以提升通量；GVS超滤离心管采用PES 膜具有天然亲水性，通常不需要预处理。

✔ 3. 检查离心兼容性

阅读规格参数，确认以下内容：

· 最大离心力（RCF）

· 是否用于角式或水平转子

· 适配的离心机类型

二、超滤离心管的标准操作步骤

步骤 1：加入样品

1. 打开离心管的盖子。

2. 将样品加入上层过滤仓，通常不超过最大容量的 2/3。

3. 若样品黏度高，可采用分次加入方式。

步骤 2：平衡离心

与普通离心操作一致，需要配平离心管：

· 确保重量匹配

· 保持对称放置

这可保证转子平衡、延长离心机寿命，并避免样品飞溅。

步骤 3：设定离心条件

根据产品说明书设置：

· 转速：如 3,000–5,000 × g（示例，视产品型号）

· 时间：10–30 分钟，随体积和通量而变化

· 温度：建议 4°C 或室温，视样品稳定性而定

离心过程中，溶液会透过超滤膜进入下层收集室，而大分子（如蛋白或核酸）被截留在上层。

步骤 4：检查浓缩结果

离心结束后：

· 观察上层截留液体体积

· 若浓缩不足，可延长离心时间

· 若过度浓缩，可加入缓冲液重新调整体积并轻轻混匀

步骤 5：缓冲液更换（可选）

用于蛋白、核酸分析前处理：

1. 在完成首次浓缩后加入目标缓冲液

2. 再次离心至所需体积

3. 重复 1–2 次即可完成 Buffer Exchange

步骤 6：收集样品

截留液通常是目标分子所在的部分：

· 将上层滤杯取出

· 使用移液器收集截留样品

· 若样品粘附膜表面，可轻轻反 pipette 几次进行回收
（PES 膜低吸附，可提高回收率）

三、使用过程中的常见问题与解决方案

1. 过滤太慢？

可能原因：

· 样品黏度高

· 转速不足

· 过滤膜未完全润湿

· 温度过低影响流体性

解决方式：
✔ 提前预热样品
✔ 提高离心力（在允许范围内）
✔ 避免样品中颗粒物堵塞膜

2. 样品回收率低？

可能原因：

· MWCO 选择不当

· 离心过度导致样品干膜

· 未回收附着在膜表面的液体

建议：
✔ 选择更适合的 MWCO
✔ 离心后立即回收
✔ 轻轻反复吹打（pipette up & down）提升回收率

四、注意事项与操作安全

· 不可超过最大离心力

· 不可混用不同品牌离心转子

· 避免样品含颗粒物（建议预过滤）

· 如需灭菌，需确认产品是否可高压灭菌

· 每次使用后及时检查膜完整性

结合优化设计的GVS 超滤离心管（双面膜结构、更大过滤面积、PES 高通量膜），可显著缩短过滤时间并提升回收率，是实验室高效超滤操作的理想选择。

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