在 Western Blot（WB）实验 中，很多人把注意力放在膜材质（NC / PVDF）上，却忽略了一个同样关键的因素——孔径（pore size）。
选错孔径，可能出现：
· 小分子蛋白“穿膜丢失”
· 大分子蛋白转印不完全
· 条带弱、甚至没有信号
这篇文章帮你一次讲清：0.2 μm 和 0.45 μm到底怎么选？
一、0.2 μm vs 0.45 μm核心区别
对比维度 | 0.2 μm 转印膜 | 0.45 μm 转印膜 |
孔径大小 | 更小 | 更大 |
转印效率 | 较慢 | 更快 |
蛋白截留能力 | 更强（不易丢失小蛋白） | 一般（小蛋白可能穿透） |
背景水平 | 可能略高 | 相对更低、更稳定 |
堵膜风险 | 更高（易阻塞） | 较低 |
应用范围 | 小蛋白 / 多肽检测 | 常规Western Blot |
使用普遍性 | 相对较少 | 最常用规格 |
孔径越小 = 拦截越强，但转印越慢
孔径越大 = 转印更快，但可能漏蛋白
小蛋白容易穿过大孔径（0.45μm，大蛋白需要更高转印效率（大孔更容易通过）
按蛋白分子量选择：< 20 kDa小分子蛋白，推荐用0.2μm，>20 kDa中分子蛋白，推荐用0.45μm。
二、常见搭配组合
ü 常规WB：PVDF + 0.45 μm
ü 小蛋白：PVDF + 0.2 μm
ü 简单实验：NC + 0.45 μm
基本上80%的实验，使用0.45μm，如果不确定蛋白大小，建议先选0.45μm，更稳妥
小于20kDa，必须考虑0.2μm
孔径是Western Blot实验成果的关键因素，孔径的选很多时候大于材质选择影响。
关于转印膜材的选择可以参阅：https://www.gvs-lifesciences.cn/knowlegde/70.html
意大利吉威思GVS产品推荐
NC转印膜 | PVDF转印膜 | 中性尼龙 | 带正电尼龙 | |
0.22um | 1215458 | 1214429 | 1213405 | / |
0.45um | 1215471 | 1212639 | 1213364 | 1226556 |
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